【求助】脑组织免疫荧光，大家帮我分析一下

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冰冻切片 30微米，漂片法
1 0.3％Trition-100＋2％BSA 1小时 室温 洗3次，每次5分钟
2一抗＋3％山羊血清 4度 30小时 洗3次，每次5分钟
3 二抗3小时， 洗3次，每次5分钟
4 封片
看看结果，是不是背景太亮了，不大家帮我分析一下原因。
而且0.3％Trition-100孵育的时间是不是长了点。
这个是10倍的

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