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发表于 2008-07-28
【求助】是我的问题太弱么?为什么那么长时间没人答理我呢?点击查看 《【求助】是我的问题太弱么?为什么那么长时间没人答理我呢?》 全文>>>>>>我想做柱上复性!用分子筛可以么?是不是还可以达到进一步纯化的效果呢?具体该怎么做?平衡用有尿素的可是上完样品后呢?用什么?要不要加点保护试剂呢?谢谢!此外还有啥复姓方法呢,具... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】定影液配制！点击查看 《【求助】定影液配制！》 全文>>>>>>有没有兄弟姐妹用过碧云天的定影液。我用的是1L小包装的定影剂A,B液，在50度的水中加入A，B试剂以后，水温突然下降，过了20分钟发现有许多物质不溶。就将配试剂的烧杯放入50度水浴。结果2个小时后，还是有许多物质不溶。在常温下，避光保存一天，以后，... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】蛋白为什么成冻状？点击查看 《【求助】蛋白为什么成冻状？》 全文>>>>>>纯化后的蛋白8M尿素溶解离心取上清，-20保存，每次用的时候蛋白总是成絮状沉淀，冰山荣华总是有一团冻状的结构，乳化起来也比较费劲，免疫动物时很难往进推。大家帮我分析一下，谢谢同求，我做的是另外的一种酶，也有上面说的那种情况！！... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】求助：BMP(bone morphogenetic protein)直径有多少nm？点击查看 《【求助】求助：BMP(bone morphogenetic protein)直径有多少nm？》 全文>>>>>>求助：没有那位大侠知道吗？BMP(bone morphogenetic protein)直径有多少nm？能否包裹在脂质体中？点击查看 《【求助】求助：BMP(bone morphogenetic protein)直径有多... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】羟基磷灰石纯化小鼠IgG的方法点击查看 《【求助】羟基磷灰石纯化小鼠IgG的方法》 全文>>>>>>我最近在纯化小鼠的lgG，我用的是羟基磷灰石商品柱，Ａ液选择的是１０mMＰＢ缓冲液，Ｂ液选择的是4００mMＰＢ缓冲液，效果不佳．请问缓冲液的选择是否有问题，该如何选择？ 在上样平衡时出现的峰值比较像目的蛋白．目的... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】（急）请教蛋白质Ｍarker的选择问题点击查看 《【求助】（急）请教蛋白质Ｍarker的选择问题》 全文>>>>>>需要做一条新基因的原核表达纯化与多抗制备，通过软件预测该基因编码１１７个氨基酸，请问下面做表达后做sds-page鉴定目的蛋白大小时选择那种分子量的Ｍarker，买那个公司的好些，请各位高手指教，非常感谢... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】Ni柱纯化问题点击查看 《【求助】Ni柱纯化问题》 全文>>>>>>收集细胞后，超声破碎。在上清里加0.2%的Tween20后上柱。然后用pH6.0buffer洗至OD280<0.01,再分别用20mM，40mM咪唑洗，用100、200、300mM洗脱。 问题： 有时候目的蛋白会在20或者40的时候被大量洗脱下来，再将上清上柱两次或者降低流速后这种... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】求教Lambda蛋白磷酸酶使用方法点击查看 《【求助】求教Lambda蛋白磷酸酶使用方法》 全文>>>>>>我实验过程中要用到Lambda蛋白磷酸酶消化细胞总蛋白,不知道具体用法用量如何?Lambda蛋白磷酸酶购自Sigma公司,包括磷酸酶,10×磷酸酶缓冲液及10×二价Mn离子点击查看 《【求助】求教Lambda蛋白磷酸酶使用方法》 全文>>... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】用pET32a质粒换Rosetta菌。点击查看 《【求助】用pET32a质粒换Rosetta菌。》 全文>>>>>>用pET32a质粒换Rosetta菌。电话：**QQ：**E-Mail：**我有Rosetta,请pm联系我点击查看 《【求助】用pET32a质粒换Rosetta菌。》 全文>>>>>> ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】请教一下2D QUANT KIT 的原理和缺陷点击查看 《【求助】请教一下2D QUANT KIT 的原理和缺陷》 全文>>>>>>相信很多做2D的朋友都是用过AMERSHAM的2D QUANT KIT 做定量，这个kit增加了前面把干扰显色的物质洗去的一步，应该是市面上针对2D抽提蛋白样本比较好的定量试剂盒了，但是不清除他的原理，应该也是某些氨基酸... ...全文
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发表于 2008-07-28
【专题讨论】细胞培养基中分泌性蛋白的蛋白质组学研究点击查看 《【专题讨论】细胞培养基中分泌性蛋白的蛋白质组学研究》 全文>>>>>>细胞培养基中分泌性蛋白的蛋白质组学研究，不知道各位前辈对此有什么建议，有何看法。贴一篇文献e example of the myeloid cells secretome.part1.rar (292.97k)第二部分e example of th... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】帮忙看看2D胶图点击查看 《【求助】帮忙看看2D胶图》 全文>>>>>>IPG胶条:17cm，3-10NL凝胶：12%（缩略图，点击图片链接看原图）银染，上样量为300ug。二向电泳我是以功率为标准，先是2w30分钟，在是20w，运行了大约6h。请各位帮忙分析一下！！！非常感谢。哦，以功率为标准的话，我是第一次听说了.估计功率运行和... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】怎样用质谱鉴定新蛋白？？点击查看 《【求助】怎样用质谱鉴定新蛋白？？》 全文>>>>>>请问，在蛋白质组学研究中，当质谱数据在蛋白质数据库中搜索不到结果时，怎样才能知道我鉴定的这个蛋白质是一个新蛋白，而不是由于质谱技术的原因导致检索失败。 多谢大家了！！！拿出序列信息，说明新蛋白。PMF不能说明点击查... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】试剂与2D胶图的关系点击查看 《【求助】试剂与2D胶图的关系》 全文>>>>>>请问有人用进口分装的试剂跑出质量较好的2D胶图谱吗？是不是必须买原装的试剂呀？很是着急，急盼恢复最好一向买进口的，二项可以买分装的点击查看 《【求助】试剂与2D胶图的关系》 全文>>>>>> ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】裂解液问题点击查看 《【求助】裂解液问题》 全文>>>>>>在做双向电泳时，大家用的试剂都是进口原装的吗？分装的行吗？如尿素，chaps,DTT等，作出来的图谱，它们的区别大吗？请大家给我一点建议好吗国产的主要是不稳定点击查看 《【求助】裂解液问题》 全文>>>>>> ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】还是请教聚焦电压上不去的问题点击查看 《【求助】还是请教聚焦电压上不去的问题》 全文>>>>>>我做7cm目标电压4000一般在2000左右就升不上去了，这时候电流已达到极限电流30微安，做17cm目标电压8000一般在4000左右升不上去，电流也达极限电流50微安，大家有谁遇到这样的情况吗？是怎么处理的呢？谢谢各位！哪里... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】想做磷酸化的细胞外信号调节激酶（P-ERK）蛋白点击查看 《【求助】想做磷酸化的细胞外信号调节激酶（P-ERK）蛋白》 全文>>>>>>小弟是新手，不是很懂wb，最近想做小鼠脑内组织磷酸化的细胞外信号调节激酶（P-ERK）蛋白的变化情况，请问各位大侠，是不是还必须知道ERK上磷酸化的具体位点才能行啊？将组织样品先液氮... ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】谁有猪血管的2DE蛋白图谱？点击查看 《【求助】谁有猪血管的2DE蛋白图谱？》 全文>>>>>>可否给一张对比一下？怀疑自己做的有问题你是做什么的，我也坐着一块的，发现很多高风度蛋白没法去除，你是怎么做的呢？点击查看 《【求助】谁有猪血管的2DE蛋白图谱？》 全文>>>>>> ...全文
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发表于 2008-07-28
【求助】等电聚焦电压升不上去点击查看 《【求助】等电聚焦电压升不上去》 全文>>>>>>我使用TCA-丙酮法提的全蛋白，可是为什么聚焦时电压升不上去，是不是盐离子浓度过高，我应该怎样去盐？一般除盐的方法有将样品用丙酮沉淀，而我的样品本身很就是用丙酮沉淀得到的，这是为什么呀？亟盼恢复用2D clean up试剂盒处理一下... ...全文
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发表于 2008-07-28
【专题讨论】关于蛋白质多肽跑完电泳后处理点击查看 《【专题讨论】关于蛋白质多肽跑完电泳后处理》 全文>>>>>>最近要做个蛋白质小肽分离鉴定实验,目的是测出小肽的分子量和结构,通过质谱分析来完成这个工作. 我的多肽是通过SDS-PAGE.聚丙烯酰胺凝胶电泳跑出来的。小肽能清楚地看出来。问题是：要怎么样才能把小肽从凝胶... ...全文
